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详细解读酶联免疫分析试剂盒作用的基本原理

发布时间:2022-08-15      点击次数:36
  酶联免疫分析试剂盒是酶免疫测定技术中应用广的技术。其基本方法是将已知抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体在固相表面反应,并通过洗涤洗涤液相中的游离组分。常用的ELISA方法包括双抗体夹心法和间接法。前者用于检测大分子抗原,后者用于确定特异性抗体。
  酶联免疫分析试剂盒作用的基本原理是指酶分子与抗体或抗抗体分子的共价结合,不会改变抗体的免疫学特性,不会影响酶的生物活性。酶标记抗体可以特异性结合吸附在固相载体上的抗原或抗体。滴下底物溶液后,在酶的作用下,底物中所含的氢供体可由无色还原态转变为有色氧化态,并发生显色反应。相应免疫反应的存在或不存在可以通过底物的颜色反应来确定。显色反应与样品中相应抗体或抗原的量成正比。这种显色反应可以用ELISA检测器定量测定,它结合了酶化学反应的敏感性和抗原抗体反应的特异性,使ELISA成为一种特异、灵敏的检测方法。
  酶联免疫分析试剂盒取用规范:
  1.试剂盒从冷藏环境中取山应在空温平衡十五到三十分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
  2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
  3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在五分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
  4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高,请先用样品稀释液稀释一定倍数后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数。
  5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物请避光保存。
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