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使用ELISA检测试剂盒时需要遵守的问题有很多?

发布时间:2022-09-19      点击次数:98
  ELISA检测试剂盒可实现多种分泌性蛋白(细胞因子、趋化因子、生长因子等)的同时检测和定量,对于生物系统的综合研究而言具有宝贵价值。不但具有更优的效率、速度和检测范围。采用多重检测能降低每个靶标结果的成本。
  ELISA检测试剂盒的作用原理:
  1. 抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面,或是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫学活性;
  2. 抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性;
  3. 酶结合物与相应抗原或抗体结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的,因此,可以按底物显色的程度显示试验结果。
  ELISA检测试剂盒使用注意事项:
  1.试剂的选择:选择优良试剂大家都是知道的,但是在检测之前还应该提前半个小时将试剂拿到常温下进行解冻。
  2.显色问题: 使用了过期的显色剂或者是显色剂用过后放置时间太长,都有可能造成显色剂不显色。所以在进行显色反应的时候,要先查看显色剂本身的情况。
  3.加样中可能遇到的问题:在做血清或是血浆用于检测试剂的时候,会碰到血清血浆不好分离的情况,这个时候的解决办法是先放在常温中1到2小时,然后在进行离心处理。
  4.洗板时容易造成误差: 因为洗板是人工洗的,所以判断什么时候洗干净了也是人为判断的,这个时候带有主观色彩,所以多清洗几次,还有就是在洗的时候孔与孔之间的液体容易交叉流动。
  5.终止反应:在加终止剂的时候由于倾倒速度快,差生气泡,造成假阳性结果。所以在倒终止剂的时候要缓慢倒。
  6.读板:读板的时候首先应该保证板的清洁干净。
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