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小鼠碱性磷酸酶(AKP)ELISA试剂盒使用注意事项

更新时间:2024-05-28      点击次数:234
小鼠碱性磷酸酶(AKP)ELISA试剂盒用于测定用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中碱性磷酸酶(AKP)的活性。
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠碱性磷酸酶(AKP)水平。用纯化的小鼠碱性磷酸酶(AKP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入碱性磷酸酶(AKP),再与HRP标记的碱性磷酸酶(AKP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的碱性磷酸酶(AKP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠碱性磷酸酶(AKP)活性浓度。
注意事项:
1、试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2、浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3、各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4、请每次测定的同时做标准曲线,建议做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6、底物请避光保存。
7、严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
8、所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9、本试剂不同批号组分不得混用。
 
 
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