atcc菌种的培养有哪些要求？

　　atcc菌种的培养要求严格，需遵循标准化操作流程，确保菌种的活性、纯度和遗传稳定性。

　　一、atcc菌种培养基要求：

　　1.使用指定配方：

　　必须按照ATCC或说明书提供的特定培养基配方，不可随意替换成分。

　　2.培养基制备与灭菌：

　　自制培养基需高压灭菌，冷却至50℃以下再倒板或分装。

　　市售培养基需选择可靠品牌，并检查保质期和批号一致性。

　　3.添加特殊成分：

　　部分菌种需额外添加生长因子、抗生素（如万古霉素）或血液（如羊血、马血）。

　　二、atcc菌种操作规范要求：

　　1.无菌操作：

　　接种前用75%酒精擦拭台面和器械，接种环需灼烧灭菌（酒精灯火焰中加热至通红）。

　　冻干菌种复苏时，需快速解冻，避免污染。

　　2.传代限制：

　　避免频繁传代，否则可能导致基因变异或活力下降。

　　长期保存需用甘油管（-80℃）或液氮冷冻保存。

　　3.污染防控：

　　定期清洁培养箱，清除污染皿，并用紫外灯消毒。

　　若发现杂菌污染（如霉菌斑点），立即弃用并复查操作流程。

　　三、atcc菌种保存与管理要求

　　1.短期保存：

　　斜面低温保存：菌种接种于斜面培养基，37℃培养后密封，4℃保存（通常1-4周）。

　　甘油冷冻保存：菌液与30%甘油混合（1:1），存入-80℃冰箱或液氮罐。

　　2.长期保存：

　　液氮罐为最佳方法，需定期补充液氮。

　　冻干法（需专业设备）：真空冻干后密封，室温或4℃保存。

　　3.存活性验证：

　　定期复苏菌种（如每半年一次），检查生长状态（菌落形态、革兰染色结果）。

　　若活力下降，需从原始冻存管重新接种。