您好!欢迎访问优利科(上海)生命科学有限公司网站!
全国服务咨询热线:

15021281375

当前位置:首页 > 产品中心 > 科研试剂盒 > 生化试剂盒 > 多聚半乳糖醛酸酶(PG)试剂盒

多聚半乳糖醛酸酶(PG)试剂盒

简要描述:多聚半乳糖醛酸酶(EC3.2.1.15)是一种细胞壁结合蛋白,可以催化果胶分子中α-(1,4)-聚半乳糖醛酸的裂解,参与果胶的降解,使细胞壁结构解体,导致果实软化,与果实成熟、叶和花的脱落、病原物防御,细胞伸展发育以及木质化有关,在植物抗病性和食品贮藏保鲜领域具有较高的研究价值。多聚半乳糖醛酸酶(PG)试剂盒仅供科研。

  • 更新时间:2023-07-09
  • 厂商性质:生产厂家
  • 生产地址:上海
  • 访  问  量:991

相关文章

Related Articles

详细介绍

品牌YLKBIOCAS详见说明书
分子式详见说明书纯度详见说明书
分子量详见说明书货号YLK-SH101
规格100管/48样、50管/24样供货周期现货
主要用途科研应用领域化工,生物产业
测试方法:微量法、可见分光光度法

多聚半乳糖醛酸酶(ploygalacturonasePG)试剂盒说明书

   微量法100T/48S

 

    意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

多聚半乳糖醛酸酶(EC3.2.1.15)是一种细胞壁结合蛋白,可以催化果胶分子中α-(1,4)-聚半乳糖醛酸的裂解,参与果胶的降解,使细胞壁结构解体,导致果实软化,与果实成熟、叶和花的脱落、病原物防御,细胞伸展发育以及木质化有关,在植物抗病性和食品贮藏保鲜领域具有较高的研究价值。

 

测定原理:

多聚半乳糖醛酸酶水解果胶酸生成半乳糖醛酸,具有还原性醛基,与DNS试剂反应生成红棕色物质,在540nm有特征吸收峰,测定540nm处吸光值变化可计算得多聚半乳糖醛酸酶活性。

 

自备实验用品及仪器:

天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。

 

试剂组成和配制:

提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:液体8mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体15mL×1瓶,4℃避光保存。

 

酶液提取:

1.组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。16000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2.细菌、真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~10001的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后16000g4℃离心10min,取上清置于冰上待测。

3.培养液:直接检测。

 

测定操作表:

 


对照管

测定管

样本(μL


30

煮沸样本(μL

30


试剂一(μL


120

蒸馏水

120


40℃水浴30min

试剂二(μL

150

150

沸水浴5min,冰浴或自来水冷却,取200μL于微量石英比色皿/96孔板测定540nm处吸光值A,△A=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。

 

多聚半乳糖醛酸酶(PG)试剂盒酶活性计算公式

a.        用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线:y = 3.9642x - 0.008R2 = 0.9996x为标准品浓度,mg/mLy为吸光值。

1.按照蛋白浓度计算

酶活性定义:40℃,pH6.0条件下,每毫克蛋白每小时分解果胶酸产生1mg半乳糖醛酸为一个酶活力单位。

PG活性(mg/h/mg prot= (ΔA+0.008) ÷3.9642×V反总÷V×Cpr÷T

= 2.523×(ΔA+0.008)÷Cpr

2.按照样本质量计算

酶活性定义:40℃,pH6.0条件下,每克样本每小时分解果胶酸产生1mg半乳糖醛酸为一个酶活力单位。

PG活性(mg/h/g 鲜重)=(ΔA+0.008) ÷3.9642×V反总÷V×W÷V样总)÷T

= 2.523×(ΔA+0.008)÷W

3.按液体体积计算

酶活性定义:40℃,pH6.0条件下,每毫升培养液每小时分解果胶酸产生1mg半乳糖醛酸为一个酶活力单位。

PG活性(mg/h/mL=(ΔA+0.008) ÷3.9642×V反总÷V÷T=2.523×(ΔA+0.008)

4. 按细胞数量计算

酶活性定义:40℃,pH6.0条件下,每104个细胞每小时分解果胶酸产生1mg半乳糖醛酸为一个酶活力单位。

PG活性(mg/h/104cell=(ΔA+0.008) ÷3.9642×V反总÷V×细胞数量÷V样总)÷T

= 2.523×(ΔA+0.008)÷细胞数量   

V反总:反应总体积,0.15mLV样:反应中样本体积,0.03mLV样总:加入提取液体积,1mLCpr:样本蛋白浓度,mg/mLW,样本质量,gT:反应时间,0.5h

 

b.       96孔板测定的计算公式如下

标准曲线:y = 1.9821x - 0.008R2 = 0.9996x为标准品浓度,mg/mLy为吸光值。

1.按照蛋白浓度计算

酶活性定义:40℃,pH6.0条件下,每毫克蛋白每小时分解果胶酸产生1mg半乳糖醛酸为一个酶活力单位。

PG活性(mg/h/mg prot=(ΔA+0.008) ÷1.9821×V反总÷V×Cpr÷T

= 5.045×(ΔA+0.008)÷Cpr

2.按照样本质量计算

酶活性定义:40℃,pH6.0条件下,每克样本每小时分解果胶酸产生1mg半乳糖醛酸为一个酶活力单位(U)。

PG活性(mg/h/g 鲜重)=(ΔA+0.008) ÷1.9821×V反总÷V×W÷V样总)÷T

= 5.045×(ΔA+0.008)÷W

3.按液体体积计算

酶活性定义:40℃,pH6.0条件下,每毫升培养液每小时分解果胶酸产生1mg半乳糖醛酸为一个酶活力单位(U)。

PG活性(mg/h/mL=(ΔA+0.008) ÷1.9821×V反总÷V÷T=5.045×(ΔA+0.008)

 

4. 按细胞数量计算

酶活性定义:40℃pH6.0条件下,每104个细胞每小时分解果胶酸产生1mg半乳糖醛酸为一个酶活力单位(U)。

PG活性(mg/h/104cell=(ΔA+0.008) ÷1.9821×V反总÷V×细胞数量÷V样总)÷T

= 5.045×(ΔA+0.008)÷细胞数量

V反总:反应总体积,0.15mLV样:反应中样本体积,0.03mLV样总:加入提取液体积,1mLCpr:样本蛋白浓度,mg/mLW,样本质量,gT:反应时间,0.5h

 

多聚半乳糖醛酸酶(PG)试剂盒注意事项:

煮沸样本建议将样本在沸水中煮沸10分钟,以将酶彻di灭活。

产品咨询

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
优利科(上海)生命科学有限公司
地址:金大公路8218号1幢
邮箱:1431486511@qq.com
传真:
关注我们
欢迎您关注我们的微信公众号了解更多信息:
欢迎您关注我们的微信公众号
了解更多信息