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牛布鲁氏杆菌PCR试剂盒

简要描述:牛布鲁氏杆菌PCR试剂盒:牛布鲁氏杆菌(Brucella bovis,又叫Brucella abortus)又叫流产布氏杆菌,是一种革兰氏阴性的不运动细菌。

  • 更新时间:2024-04-16
  • 厂商性质:生产厂家
  • 生产地址:上海
  • 访  问  量:75

详细介绍

品牌YLKBIO货号YLK10365P
规格50T供货周期现货
主要用途科研实验应用领域化工,生物产业
英文名称Brucella Bovis PCR Kit保存条件低温运输,-20℃保存
有效期12个月试剂盒说明不同批号的试剂盒组分不可交互使用

牛布鲁氏杆菌PCR试剂盒


商品名称:牛布鲁氏杆菌PCR试剂盒

Name     :Brucella Bovis PCR Kit

牛布鲁氏杆菌(Brucella bovis,又叫Brucella abortus)又叫流产布氏杆菌,是一种革兰氏阴性的不运动细菌,无荚膜(光滑型有微荚膜),触酶、氧化酶阳性绝对嗜氧菌,可还原硝酸盐,细胞内寄生,可以在牛体内存活,也能引起人类疾病。一头奶牛如果感染布鲁氏杆菌,没有得到及时的清洁和防疫,布病很快会在牲畜群体里暴发,进而增加人被感染的几率。其特点是生殖器官、胎膜及多种器官组织发炎、坏死和肉芽肿的形成,引起流产、不孕、睾丸及关节炎等症状。感染人后可能导致多个器官或脏器系统,骨骼或关节的病变,感染组织中可观察到具有组织学特征的肉芽肿。晚期可能失去劳动能力、卧床不起、出现神经或精神病方面的症状。因此牛布鲁氏菌的检测具有重要的意义。本试剂盒根据PCR原理开发,它具有下列特点:

1.   即开即用,用户只需要提供细菌DNA模板。

2.   引物经过精心优化,专一性强,只扩增牛布鲁氏杆菌。

3.   提供阳性对照,便于区分假阴性样品。

4.   PCR mix中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。

5.   本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次。

6.   本产品只能用于科研。

【试剂组成】

包装规格

50T/盒

PCR MagicMix 3.0

1 mL(亮黄盖)

超纯水

1 mL(蓝色)

牛布鲁氏杆PCR引物混合液

100 μL(白盖)

牛布鲁氏杆菌PCR阳性对照(1×10E8拷贝/ul)50 μL(黄盖)
核酸释放剂20次(1ml,绿盖)
使用手册1份

说明:不同批号的试剂盒组分不可交互使用。

【储存条件及有效期】

低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。

【自备试剂】

样品DNA

【使用方法】

一、样品DNA的制备

1.   如果有N个样品,必须设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL阳性对照的10000倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC

1.   用自选方法纯化样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数细菌DNA提取/试剂盒兼容。本试剂盒免费赠送20次免DNA提取的核酸释放剂,本产品的裂解液可以直接作为PCR模板,省略了DNA提取步骤。其使用手册可咨询本公司客服索取。

二、设置PCR反应(40 μL体系)

2.   N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照,故需要设置N+4个反应。在N+4PCR管中分别加入下列成分:

成分

N+2

样品管

PCR阴性对照

PCR阳性对照

PCR MagicMix 3.0

20 μL

20 μL

20 μL

牛布鲁氏杆菌 PCR引物混合液

2 μL

2 μL

2 μL

N+2个样品DNA模板

18 μL

-

-

PCR阴性对照

-

18 μL

-

PCR阳性对照(用牛布鲁氏菌PCR阳性对照的10000倍稀释液)

-

-

18 μL

3.  按下表设置PCR反应:

过程

温度

时间

预变性

94℃

5 min

PCR反应

35个循环)

94℃

30 sec

55

30 sec

72

60 sec

最后延伸

72℃

10 min

三、电泳检测

10-20 μL PCR产物。电泳检测PCR产物。本产品提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加loading buffer。预期的PCR产物长度为450bp。阳性对照必须有此条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。

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