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DNA/RNA提取试剂盒(吸附柱法)的主要检测方法

发布时间:2022-06-13      点击次数:549
DNA/RNA提取试剂盒(吸附柱法)可以从多种样本中提取DNA/RNA,包括血清、血浆、动物组织、体液等。处理的样本通过加入裂解液后,把混合物移至吸附柱中,之后可以通过洗涤、洗脱,即可分离出病毒DNA/RNA。本试剂盒提取的核酸可以用于Real-time PCR,Northern Blot,Blotting Hybridization ,cDNA library Construction等实验。
检测方法:
一、样本前处理
动物、植物组织:将样本用生理盐水或PBS缓冲液充分研磨,离心取上清后进行样本提取操作。
血清、血浆、体液等样本:直接进行样本提取操作(不足200μL,可以加入PBS缓冲液或者生理盐水补足200μL)。
二、样本提取操作:
1.取200μL处理好的样本(不足200μL,可以加入PBS缓冲液或者生理盐水补足200μL),加入500μL裂解液,振荡30秒,室温静止2分钟。注:针对难裂解样本,室温静置时间可延长至5分钟。
2.把上述混合液转移到吸附柱中(吸附柱要套上收集管,吸取液体时尽量不要吸到悬浮杂质,以免阻塞吸附膜),10000rpm离心1分钟,弃去套管中液体。
3.向吸附柱中加入500μL去蛋白漂洗液,12000rpm离心30秒,弃去套管中液体。
4.向吸附柱中加入500μL洗涤液,12000rpm离心30秒,弃去套管中液体。
5.向吸附柱中加入500μL洗涤液,12000rpm离心30秒,弃去套管中液体。
6. 12000rpm再次离心2分钟。
7.把吸附柱转移至新的1.5mL灭菌离心管中,向吸附柱中加入 50μL洗脱液,并于室温温育2分钟。
8.12000rpm离心1分钟,弃去吸附柱,1.5mL灭菌离心管中液体即为DNA/RNA溶液。提取的DNA/RNA可直接用于各种下游应用试验,如不立即使用,请于-80℃保存。
 
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