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一文看懂酶联免疫分析试剂盒的基本原理及操作流程

发布时间:2022-06-16      点击次数:49
  酶联免疫分析试剂盒基本原理是利用抗原抗体反应的特异性,通过将待测物与酶连接,然后酶与底物产生颜色反应,其所生成的颜色深浅与待测抗原(或抗体)的含量成正比。这种有色产物可用肉眼、光学显微镜、电子显微镜观察,也可以用分光光度计(酶标仪)加以测定。由于ELISA是基于抗原抗体反应的特异性,这意味着该种方法的测定对象既可为抗原也可为抗体:当被分析样本为抗原时,检测试剂可针对该种抗原产生特异性的抗体;当被分析样本为抗体时,则其目标抗原可用作结合的试剂。
  酶联免疫分析试剂盒具体的操作流程:
  1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
  2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
  3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
  4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
  5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
  6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
  7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
 

联免疫分析试剂盒

 

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