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植物总酚(Total Phenols,TP)试剂盒说明书

发布时间:2023/11/9      点击次数:515

植物总酚(Total PhenolsTP)试剂盒说明书

                                                      微量法100T/48S

 

 

   正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

植物酚类物质具有清除自由基,抗氧化抗衰老的作用,具有较高的营养价值和医疗保健作用而广泛应用于化妆品、食品、医药等领域。

 

测定原理:

在碱性条件下,酚类物质将钨钼酸还原,产生蓝色化合物,在760nm处有特征吸收峰,测760nm处的吸光值,即可得样品总酚含量。

自备实验用品及仪器:

天平、烘箱、粉碎仪、筛子、超声破碎仪、60%乙醇、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。

 

试剂组成和配制:

提取液:60%乙醇,自备。

试剂一:液体3mL×1瓶,4保存。

试剂二:液体5mL×1瓶,4保存。

总酚提取:

直接检测

 

测定操作表:

1、   分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长至760nm,蒸馏水调零。

2、   操作表


对照管

测定管

样本待测液(µL

10

10

试剂一(µL


50

混匀,25℃静置2min

试剂二(µL

50

50

H2OµL

140

90

混匀,25℃静置10 min,于微量石英比色皿/96孔板中,测定760nm吸光值,ΔA=A测定-A对照。

 

总酚含量计算公式:

标准曲线:y = 2.808x+0.0012R2 = 0.9994

总酚含量(mg/g 干重)=ΔA-0.0012 ÷2.808

                     = 0.356×ΔA–0.0012

 

注意事项:

 

1. 吸光值大于2,样品适当稀释再测定,注意计算公式里乘以稀释倍数。

2. 试剂一对皮肤有一定的刺激性,请操作时做好防护措施。

3. Z低检出限为2.4 μg/g


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