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乙醇含量测定试剂盒

简要描述:乙醇含量测定试剂盒测定意义:酒是含酒精(乙醇)饮料的统称,乙醇是酒的主要成分,是衡量酒质量的重要指标之一。我国是世界上Z早发明酿酒的国家,也是酒类产品消费大国,其消费量居世界zhi首。因此,快速、准确测定酒中乙醇含量,对于确保酒的质量和保护消费者的健康具有重大意义。

  • 更新时间:2023-07-09
  • 厂商性质:生产厂家
  • 生产地址:上海
  • 访  问  量:537

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详细介绍

品牌YLKBIOCAS详见说明书
分子式详见说明书纯度详见说明书
分子量详见说明书货号YLK-SH117
规格100管/96样、50管/48样供货周期现货
主要用途科研应用领域化工,生物产业
测定方法:微量法、可见分光光度法

乙醇含量测定试剂盒说明书

 

   微量法100/96

 

注 意:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

 

测定意义:

 

酒是含酒精(乙醇)饮料的统称,乙醇是酒的主要成分,是衡量酒质量的重要指标之一。我国是世界上Z早发明酿酒的国家,也是酒类产品消费大国,其消费量居世界zhi首。因此,快速、准确测定酒中乙醇含量,对于确保酒的质量和保护消费者的健康具有重大意义。

 

 

测定原理:

 

乙醇在乙醇脱氢酶的催化下氧化脱氢生成乙醛,同时,NAD 被还原生成 NADHNADH 1-mPMS 的作用下使 WST-8 显橙黄色,通过 450 nm 下测定吸光值变化可测得乙醇含量。

 

需自备的仪器和用品:

 

酶标仪、台式离心机、可调式移液器、96 孔板、研钵、冰、蒸馏水。

 

 

试剂的组成和配制:

 

试剂一:液体 12 mL×1 ,4℃保存;

 

试剂二:粉剂×1 , -20℃保存;临用前加入 6 mL 试剂三充分溶解待用,用不完的试剂分装后-20℃保存;

 

试剂三:液体 10 mL×1 ,4℃保存;

 

试剂四:液体 1.5mL×1 管, 4℃避光保存。

 

 

乙醇提取:

 

1.    组织:按照组织质量(g):蒸馏水体积(mL) 15~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 蒸馏水),进行匀浆,8000g25℃离心 10min,取上清待测。

 

2.   细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):蒸馏水体积(mL)为 500~10001 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 蒸馏水),超声波破碎(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次), 8000g25℃离心 10min,取上清待测。

 

3.   血清(浆)等液体样品:直接测定。

 

 

测定步骤:

 

1.   酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 450nm

 

2.   工作液的配制:临用前按照样本数量,按以下比例配制工作液

 

试剂名称                                       体积(μL

 

试剂一                                                 100

 

试剂二                                                   50

 

试剂四                                                   10

 

3.   样本测定

 

按下表在 96 孔板中加入如下试剂

 

试剂名称                                       体积(μL

 

样本                                                    40

 

测定工作液                                              160

 

混匀后记录 450nm 下测定初始吸光值 A1,和 37℃避光孵育 10min 后的吸光值 A2,计算A=A2-A1

 


乙醇含量计算:

 

标准条件下测定回归方程为 y = 0.0256x + 0.0055

R2 =   0.9991

x 为乙醇含量(μmol/mL),y 为吸光值差值A

 

1.   按照血清(浆)体积计算

乙醇含量(μmol/mL= (A-0.0055)÷0.0256

=39.1×(A-0.0055)

 

2.   按照样品质量计算

乙醇含量(μmol/g 鲜重)= [ (A-0.0055)÷0.0256×V1]÷(W ×V1÷V2

=  39.1×(A-0.0055)÷W

 

3.   按照细菌或细胞密度计算

乙醇含量(μmol/104 cell= [ (A-0.0055)÷0.0256×V1]÷500×V1÷V2

=0.078×(A-0.0055)

 

V1:加入反应体系中样本体积,0.04mLV2:加入提取液体积,1 mL Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mLW:样本质量,g500:细菌或细胞总数,500 万;

 

 

注意事项:

 

测定前取 1-2 个样做预实验,若A0.3 或乙醇含量﹥10μmol/mL,需将样本用蒸馏水稀释后再测定,以确保测定的准确性。

 

Z低检测限:0.02μmol/mL


乙醇含量测定试剂盒仅供科研!    

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